home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ The Arsenal Files 6 / The Arsenal Files 6 (Arsenal Computer).ISO / health / med9603.zip / M9630591.TXT < prev    next >
Text File  |  1996-02-27  |  2KB  |  38 lines
  1.        Document 0591
  2.  DOCN  M9630591
  3.  TI    Expression and purification of the HIV type 1 Rev protein produced in
  4.        Escherichia coli and its use in the generation of monoclonal antibodies.
  5.  DT    9603
  6.  AU    Orsini MJ; Thakur AN; Andrews WW; Hammarskjold ML; Rekosh D; Department
  7.        of Biochemistry, University at Buffalo, New York; 14214, USA.
  8.  SO    AIDS Res Hum Retroviruses. 1995 Aug;11(8):945-53. Unique Identifier :
  9.        AIDSLINE MED/96020095
  10.  AB    We have developed a simple and rapid procedure for the purification of
  11.        large amounts of Rev protein overexpressed in E. coli. The purification
  12.        method, which does not require denaturation of the protein, takes
  13.        advantage of the positively charged nature of Rev and the ability of Rev
  14.        to interact with nucleic acids. The purified protein was used to develop
  15.        three novel murine monoclonal antibodies against Rev. Using fusion
  16.        proteins between glutathione S-transferase (GST) and various fragments
  17.        of the Rev protein, we mapped the specificity of these antibodies to
  18.        different regions of the Rev protein. One antibody, 3H6, is directed
  19.        against the nucleolar localization/RRE-binding domain of Rev between
  20.        amino acids 38 and 44. Another antibody, 3G4, recognizes an epitope
  21.        between amino acids 90 and 116 of Rev. A third antibody, 2G2, does not
  22.        recognize any of the fusion proteins, and may be directed against a
  23.        conformational epitope. All three antibodies are able to detect Rev on
  24.        Western blots and to immunoprecipitate Rev under native conditions.
  25.        However, only 3H6 and 3G4 immunoprecipitate Rev under denaturing
  26.        conditions and are able to detect Rev expressed in transfected cells by
  27.        indirect immunofluorescence. These antibodies should prove useful in
  28.        further studies of Rev function.
  29.  DE    Antibodies, Monoclonal/*IMMUNOLOGY/ISOLATION & PURIF  Base Sequence
  30.        Escherichia coli/GENETICS  Gene Products,
  31.        rev/GENETICS/*IMMUNOLOGY/*ISOLATION & PURIF  Human  Molecular Sequence
  32.        Data  Recombinant Fusion Proteins/GENETICS/IMMUNOLOGY/ISOLATION & PURIF
  33.        JOURNAL ARTICLE
  34.  
  35.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  36.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  37.  
  38.